Vamos falar um pouco sobre o Limite de Detecção.

Quando são realizadas medidas em amostras com baixos níveis do analito ou de uma propriedade, como, por exemplo, análise de traços, é importante saber qual o menor valor de concentração do analito ou da propriedade que pode ser detectado pelo método.

Essa menor concentração do analito que pode ser detectado é justamente o limite de detecção.

Ele é determinado pela análise de amostras com concentrações conhecidas de analito ou por valores de propriedades conhecidos e pela definição de um nível mínimo em que o analito/propriedade pode ser detectado com confiança.

Existem diversas maneiras de calcular esse valor. 

INMETRO. Orientações sobre validação de métodos analíticos (DOQ-CGCRE-008). Abril 2020. Disponível em: https://www.gov.br/inmetro/pt-br

Vamos falar dos parâmetros de Linearidade, Faixa de Trabalho, Faixa Linear de trabalho e Sensibilidade, que, como vocês podem ver, estão muito conectados entre si.

Na última figura, vocês podem observar um exemplo de curva analítica com a identificação destes parâmetros.

É importante lembrar alguns pontos: 

A faixa de trabalho deve cobrir a faixa de aplicação para a qual o ensaio vai ser usado;

A concentração mais esperada da amostra deve, sempre que possível, se situar no centro da faixa de trabalho;

No limite inferior da faixa de concentração, o fator limitante é o valor do limite de quantificação, LOQ (futuro post);

No limite superior, os fatores limitantes dependem do sistema de resposta do equipamento de medição. 

Para entender melhor como obter cada um destes parâmetros, sugerimos a leitura do documento “Orientação sobre validação de métodos analíticos” (DOQ-CGCRE-008) do INMETRO, que é a nossa referência para este post.

Restou alguma dúvida? Estamos aqui pra esclarecê-la.

O primeiro parâmetro da validação que estamos trazendo para vocês é a Seletividade!!

A seletividade avalia o grau de interferência de espécies, que podem ser outro ingrediente ativo, excipientes, impurezas e produtos de degradação, além também de outros compostos de propriedades similares que possam estar presentes. 

Ela deve ser avaliada justamente porque esses interferentes podem aumentar ou reduzir o sinal do analito em estudo, além de que a magnitude do efeito também pode depender da concentração. 

Se a seletividade não for assegurada, a linearidade, a tendência e a precisão estarão comprometidas, pois ela assegura que o pico da resposta é exclusivamente do composto que nos interessa. Não confunda um método específico com um método seletivo!!

O método seletivo pode produzir resposta para diversos analitos, no entanto, consegue diferenciar a resposta de cada um deles. Enquanto o método específico produz resposta apenas para um analito. Mas não se preocupe, há poucos métodos cromatográficos que respondem a apenas uma substância, então será mais frequente encontrar o termo “seletividade”.

Abaixo você encontra as duas formas mais utilizadas para se avaliar a seletividade.

Esperamos ter ajudado a sanar as tuas dúvidas sobre esse assunto. Caso contrário, contate-nos ou confere a referência para este post:

INMETRO. Orientações sobre validação de métodos analíticos (DOQ-CGCRE-008). Abril 2020. Disponível em: https://www.gov.br/inmetro/pt-br

A validação é um dos procedimentos que mais realizamos no LACOM. Isso porque nós desenvolvemos métodos para identificação e quantificação de compostos, e para que esses novos métodos sejam considerados confiáveis e interpretáveis, é imprescindível que a validação seja realizada.

A validação tem o objetivo de confirmar que os métodos desenvolvidos são apropriados para o uso pretendido, através de estudos experimentais, a fim de garantir que o método atende às exigências das aplicações analíticas, assegurando a confiabilidade dos resultados.

Sendo assim, a validação engloba diversos parâmetros que devem ser avaliados conforme o ensaio necessite. Os parâmetros que são normalmente encontrados para validação de métodos de separação são: seletividade, linearidade/faixa de trabalho/sensibilidade, precisão, tendência/recuperação, limite de detecção, limite de quantificação e robustez.

No entanto, como comentado, aqueles que devem ser avaliados dependem do tipo de ensaio. Na figura abaixo, você pode conferir um quadro com os parâmetros que cada ensaio necessita. 

Esse quadro foi adaptado do INMETRO, que é, juntamente com a ANVISA, um órgão que disponibiliza guias para o procedimento de validação de métodos analíticos.

E aí, ficou claro? Esperamos que sim! Em caso de dúvida, entre em contato conosco ou acesse os sites dos órgãos citados.

INMETRO. Orientações sobre validação de métodos analíticos (DOQ-CGCRE-008). Abril 2020. Disponível em: https://www.gov.br/inmetro/pt-br